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Fiche · Biologie moléculaire

La technique de polymerase chain reaction (PCR) : principe, variantes et applications

Équipe pédagogique Médecine Facile · Médecine, pack Biologie cellulaire, génétique et biologie moléculaire

  • Cours de 2 pages en PDF
  • 1 schéma
  • 5 QCM corrigés

Schéma

Schéma de la fiche « La technique de polymerase chain reaction (PCR) : principe, variantes et applications » : Dénaturation, Hybridation, Élongation, ↕ brins séparés
Schéma de la fiche « La technique de polymerase chain reaction (PCR) : principe, variantes et applications », en aperçu. En pleine résolution dans le PDF.

L’essentiel en quelques lignes

La PCR (polymerase chain reaction, amplification en chaîne par polymérase) est une technique d'amplification in vitro exponentielle d'une séquence d'ADN cible, mise au point par Kary Mullis (prix Nobel 1993). À partir de quantités infimes d'acide nucléique, elle produit des millions de copies analysables. Seront envisagés son principe, ses variantes et ses principales applications.

Intérêt : outil central de la biologie moléculaire, devenu indispensable au diagnostic infectieux, génétique et onco-hématologique ainsi qu'en médecine légale.

Plan de la fiche

Les 3 parties de la fiche complète.

  1. I.Principe

    • ADN matrice (extrait de l'échantillon) contenant la séquence cible.

    La suite dans le PDF

    Le reste de la section I et les sections suivantes, la conclusion et les corrections des 4 autres QCM sont dans la fiche complète, avec les 25 fiches du pack Biologie cellulaire, génétique et biologie moléculaire.

    Voir le pack, 50 DH
  2. II.Variantes
  3. III.Principales applications

À retenir

  • Réactifs : matrice + 2 amorces + Taq polymérase + dNTP + Mg²⁺ · cycle : 94 °C → 50–65 °C → 72 °C · 2ⁿ copies
  • RT-PCR (ARN → ADNc) · temps réel : Ct ∝ 1/quantité · multiplex · nichée · applications : charge virale, BK-rifampicine, BCR-ABL, HLA, empreintes génétiques

QCM corrigé

Le 1er des 5 QCM de la fiche, avec sa correction. Choisis tes réponses, puis vérifie.

QCM 1. Concernant le principe de la PCR :

  1. AElle permet une amplification exponentielle d'une séquence d'ADN
  2. BElle utilise deux amorces complémentaires des extrémités de la séquence cible
  3. CLa Taq polymérase est thermostable
  4. DL'élongation se fait dans le sens 3' → 5'
  5. ELes ions magnésium sont nécessaires à l'activité de la polymérase
Voir la correction

Réponses justes : A, B, C, E

  • A. Vrai : 2ⁿ copies après n cycles.
  • B. Vrai : Une amorce par brin.
  • C. Vrai : Issue de Thermus aquaticus.
  • D. Faux : Faux : la synthèse se fait dans le sens 5' → 3'.
  • E. Vrai : Cofacteur.

Les 4 autres QCM de la fiche

Énoncés seulement : la correction de chaque proposition est dans le PDF.

  1. QCM 2. Concernant les étapes d'un cycle de PCR :

    1. ALa dénaturation est réalisée vers 94–95 °C
    2. BL'hybridation des amorces dépend de leur Tm
    3. CL'élongation est réalisée à 72 °C
    4. DLe nombre de copies augmente indéfiniment avec le nombre de cycles
    5. EL'électrophorèse permet de vérifier la taille du produit amplifié
  2. QCM 3. Concernant les variantes de la PCR :

    1. ALa RT-PCR comporte une étape de transcription inverse
    2. BEn PCR en temps réel, un Ct précoce traduit une quantité initiale élevée
    3. CLa PCR multiplex amplifie plusieurs cibles dans un même tube
    4. DLa PCR nichée diminue le risque de contamination
    5. ELa PCR digitale permet une quantification absolue
  3. QCM 4. Concernant les précautions et limites de la PCR :

    1. AUne contamination peut entraîner des faux positifs
    2. BUn contrôle interne permet de détecter les inhibiteurs
    3. CLa PCR distingue les bactéries vivantes des bactéries mortes
    4. DElle nécessite de connaître la séquence de la cible
    5. ELes zones pré- et post-amplification doivent être séparées
  4. QCM 5. Sont des applications de la PCR :

    1. ALa mesure de la charge virale VIH
    2. BLa détection du transcrit BCR-ABL
    3. CLe typage HLA
    4. DLes empreintes génétiques en médecine légale
    5. ELa mesure de la vitesse de sédimentation

La fiche complète dans le pack Biologie cellulaire, génétique et biologie moléculaire

Couverture du pack de fiches Biologie cellulaire, génétique et biologie moléculaire (médecine)Pack · MédecineBiologie cellulaire, génétique et biologie moléculaire25 fiches · 125 QCM corrigés · PDF50 DHle pack entier

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